滲透、殺菌雙管齊下
高金噻酮(三代)是我新鄉高金藥業(yè)有限公司會(huì )同臺灣總部科研人員,在高金噻酮(一代)的基礎上研制的第三代新型**滲透劑。物點(diǎn)表現在新型環(huán)保,**滲透,無(wú)毒殺菌,雙親型促滲劑,已有的研究結果用應用實(shí)踐證明,高金噻酮(三代)不僅具有高金噻酮(一代)的強大的滲透效力,并且對抑制植物病原真菌孢子萌發(fā)具有明顯的作用。
通過(guò)實(shí)驗,高金噻酮(三代)對植物病原真菌分生孢子、孢子囊、菌核等無(wú)性繁殖體萌發(fā)均有不同程度的抑制作用,特別針對黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病、黃瓜黑星病、稻瘟病、蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病等病害。不言而喻,抑制病原真菌分生孢子(或孢子囊、菌核)萌發(fā),將在很大程度上控制病害的發(fā)生與流行。
有關(guān)權威專(zhuān)家評論,高金噻酮(三代)屬于環(huán)保實(shí)力型滲透劑,滲透、殺菌雙管齊下。從提高殺菌劑滲透性角度解釋?zhuān)酒窐O大的提高了殺菌劑對植物葉表組織的滲透力,使藥劑迅速穿過(guò)細胞壁,預防病菌原的侵入或殺滅已侵入的病原菌,達到保護植物的目的??膳c任何殺菌劑混用或混配并提高其防治效果。從抑制病原菌孢子萌發(fā)角度解釋?zhuān)酒穼Χ喾N植物病原真菌孢子都有某種程度的抑制作用,可與各種殺菌劑特別是廣譜性殺菌劑混配,將大幅度提高對病害的防治效果。
高金噻酮(三代)對若干種植物病原真菌孢子萌發(fā)的抑制作用
“高金噻酮”(三代)是新鄉高金藥業(yè)有限公司研制開(kāi)發(fā)的新型、**、無(wú)毒、雙親型促滲劑。已有的研究結果及應用實(shí)踐證明,本品與各種農藥,包括殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑、植物生長(cháng)調節劑混用,可明顯增強對病、蟲(chóng)、草害的防治效果并減少農藥使用量??赡鲜∞r科院植保所研究表明,50%多菌靈可濕性粉劑加入1.5%高金噻酮與多菌靈單劑比較,對大葉黃楊白粉病的防治效果可提高1.5倍。一般認為,高金噻酮的增效原理可解釋為,本品極大提高了殺菌劑對植物葉表組織的滲透力,使藥劑迅速穿過(guò)細胞壁,預防病原菌的侵入或殺滅已侵入的病原菌,達到保護植物的目的。本研究通過(guò)離體(invitro)試驗發(fā)現,高金噻酮(三代)對黃瓜霜毒?。≒seudoperonosporacubensis)、馬鈴薯晚疫?。≒hytophthorainfestans)等數種植物病原真菌孢子萌發(fā)具有明顯的抑制作用。這一結果為高金噻酮(三代)與殺菌劑復配增效原理提供了新證據,也為高金噻酮(三代)與何種殺菌劑復配防治何種病害更有效提供了生物學(xué)信息。試驗結果報告如下:
1.材料與方法
1.1供試藥劑
高金噻酮(三代)有效成份含量99.9%新鄉高金藥業(yè)有限公司提供
1.2供試菌種
黃瓜霜霉病Pseudoperonosporacubensis
馬鈴薯晚疫病Phyrophthorainfestans
黃瓜黑心病Cladosporiumcucumerinum
水稻稻瘟病Phyriculariaoryzae
蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病Alternariamali
梨黑斑病Alternariakikuchiana
番茄早疫病Alternariasolani
番茄葉霉病Cladosporiumfulvam
水稻紋枯病pelliculariasasakii
油菜菌核病Sclerotiniasclerotiorum
上述菌種除黃瓜霜霉田間采集外,其余均為南開(kāi)大學(xué)元素有機化學(xué)研究所保存菌.
1.3供試菌孢子獨得法、孢子懸浮液配制及萌發(fā)試驗法
1.31黃瓜霜霉病:田間采集新鮮病葉,清水衛洗后保存于20℃,相對濕潤度100%條件下,24小時(shí)后葉背即可產(chǎn)生黑色霉層(孢子囊),用濕毛筆將孢子囊刷至蒸餾水中,玻璃纖維過(guò)濾,制成低倍鏡下(10×15)每視野30-50個(gè)孢子囊懸浮液.采用“載玻璃片懸滴法”進(jìn)行孢子萌發(fā)試驗。具體操作過(guò)程是,將孢子囊懸浮液分別滴加在載玻片上,置于20℃、相對濕度100%條件下,24小時(shí)發(fā)鏡檢孢子囊萌發(fā)率。孢子囊內含物全空或部分空判斷為萌發(fā),孢子囊充滿(mǎn)內含物保持處理狀態(tài)視為不萌發(fā)。
1.32馬鈴薯晚疫?。簩⒐┰嚲臃N于V-8培養基平板,20℃黑暗培養二周即可形成孢子囊,用濕毛筆將孢子囊刷至蒸餾水中,玻璃纖維過(guò)濾,制成低倍鏡下(10×15)每視野30-50個(gè)孢子囊懸浮液。采用與黃瓜霜霉病相同的方法進(jìn)行孢子萌發(fā)試驗.
1.33水稻稻瘟病:將供試菌接種于燕麥培養基平板,25℃黑暗培養7-10天,自來(lái)水沖洗除去*生菌絲,BLB燈下照射48小時(shí)即可產(chǎn)生分生孢子.孢子懸浮液的配制及孢子萌發(fā)試驗法與馬鈴薯晚疫病相同.但鏡*時(shí)間為處理后12小時(shí),孢子萌發(fā)判斷標準;當芽管長(cháng)度大于孢子短莖1/2時(shí)視為萌發(fā).
1.34水稻稻瘟?。簩⒐┰囼灳臃N于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,自來(lái)水沖洗耳恭聽(tīng)除去氣生菌絲,BLB燈下照射48小時(shí)即可產(chǎn)生分生孢子。孢子懸浮液的配制及孢子萌發(fā)試驗法均與水稻稻瘟病相同。
1.35蘋(píng)果斑點(diǎn)勤務(wù)員葉病、番茄早疫病、梨黑斑?。簩⒐┰囼灳臃N于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,用直徑4mm打孔器打取5枚菌*,置于20ml滅菌水中,混合器振動(dòng)1分鐘,取其0.1ml置于PSA平板內,用三角玻璃刮刀將菌液涂勻,再置于25℃下cc培養48小時(shí),即可產(chǎn)生分生孢子。孢子懸浮液的配制及孢子萌發(fā)試驗法均與水稻稻瘟病相同。
1.36番匣葉霉??;將供試菌用牙簽多點(diǎn)接種于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,接種即呆擴展成直徑為2-3mm菌團,并含有大量分生孢子。將菌團置于蒸餾水內,混合器振動(dòng)一分鐘,玻璃纖維過(guò)濾,制成孢子懸浮液。調整孢子懸浮液濃度至低倍鏡下(10×15)每視野含30-50個(gè)孢子。孢子萌發(fā)試驗法與水稻稻瘟病相同。
1.37水稻紋枯病、油菜菌核?。簩⒐┰嚲臃N于PSA培養基平板,25℃培養7-10天,即可形成多數菌核。取出菌核,自來(lái)水沖除外圍菌絲,進(jìn)一步用0.1%升汞水浸泡一分鐘,無(wú)菌水漂洗三次,陰干后置于純*酯平板表面,25℃培養48小時(shí),鏡檢菌核萌發(fā)情況,由于一個(gè)菌核可同時(shí)產(chǎn)生數十個(gè)芽管,判斷時(shí)以完全不產(chǎn)生芽管者視為有效。
1.4藥劑配制及毒力測定法
采用藥劑——孢子懸浮液混合法進(jìn)行毒力測定。**先將高金噻酮(三代)用少量丙酮溶解,然后用含有250μg·ml-sorporl-144乳化劑孢子懸乳液稀釋至設計濃度,制成一系列含有不同濃度藥劑及相同濃度孢子的混合液。以250μg·ml-sorporl-144乳化劑孢子混合液做空白對照。采用1.3項描述的“載玻片懸滴法”測定不同濃度高金噻酮(三代)對供試菌孢子萌發(fā)抑制作用,按下列公式計算孢子萌發(fā)抑制率。進(jìn)一步按濃度對數——抑制率機率值法統計高金噻酮(三代)對供試菌有效中濃度(EC50)。水稻紋枯病、油菜菌核病只做定性觀(guān)察,不統計抑制率。
孢子萌發(fā)抑率(%)=對照組孢子萌發(fā)率-處理組孢子萌發(fā)率×100%
對照組孢子萌發(fā)率2.結果與分析
高金噻酮(三代)對供試菌孢子萌發(fā)的抑制作用試驗結果列于表1。結果表明,高金噻酮(三代)對多數供試菌孢了萌發(fā)均有一定程度的抑制作用,其毒力強弱因菌種而異,如表所示,高金噻酮(三代)對黃瓜霜霉病及馬鈴薯晚疫病孢子囊萌發(fā)抑制作用*為明顯,EC50分別為12.08、21.24μg·ml-1;其次為黃瓜黑星病、稻瘟病及蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病,EC50分別為38.42、43.05、52.46μg·ml-1;再其次為梨黑斑病、番茄早疫病菌及番茄葉霉病,EC50分別為89.50、16.35、119.04μg·ml-1;高金噻酮(三代)對水稻紋枯病菌、油菜菌核病菌抑制作用較弱,但在1000、500μg·ml-1;濃度下也具有100%的抑制作用,200μg·ml-1濃度下雖無(wú)抑制作用,但芽管均較下常芽管短且有分枝異?,F象,100、50μg·ml-1濃度無(wú)抑制作用。
表1.高金噻酮三代對若干植物病原真菌孢子萌發(fā)的抑制作用
3.討論
眾所周知,植物病菌原零點(diǎn)菌的無(wú)性凡殖休,如分生孢子、孢子囊、菌核等在病害發(fā)生與流行過(guò)程中起著(zhù)十分重要的作用。這些病原體在適宜的環(huán)境條件下可作為病害的初侵染來(lái)源,導致病害的發(fā)生,另一方面,在風(fēng)、雨、流水等媒介作用下,通過(guò)這些凡殖體還可進(jìn)行再侵染和遠距離傳播,導致病害的暴發(fā)與流行。不言而喻,抑制病原菌分生孢子(或孢子囊、菌核)萌發(fā),將在很在程度上控制病害的發(fā)生與流行。
本研究發(fā)現,高金噻酮(三代)對供試十種植物病原真菌分生孢子、孢子囊、菌核等無(wú)性凡殖體萌發(fā)均有不同程度的抑制作用。其毒力順序是,黃瓜霜霉病》馬鈴薯晚設病》黃瓜黑星病》水稻稻瘟病》蘋(píng)果斑點(diǎn)勤務(wù)員葉病》梨黑斑病》番茄早疫病》番茄葉霉病》水稻紋枯?。剑接筒司斯I(yè)病。
由于本研究采用的是離體試驗法。因此,高金噻酮(三代)在防治植物病害方面的有效性及程度尚需活體乃至田間試驗驗證。但本研究結果為高金噻酮(三代)提高殺菌劑防病效果的原理提供了新線(xiàn)索。這就是除藥劑本身強大的滲透*力之外,高金噻酮(三代)抑制病原菌孢子萌發(fā),在某種程度上可能發(fā)揮了作用,對黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病、黃瓜黑星病、稻瘟病、蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病害來(lái)說(shuō),可能發(fā)揮著(zhù)十分重要的作用。
值得注意的是,高金噻酮(三代)抑制作有較強的黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病在真菌分類(lèi)學(xué)上均屬卵菌;蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病、梨黑斑病、番茄早疫病均屬半知菌的效鏈孢屬,黃瓜黑星病、番茄葉霉病又歸屬相同的Cladosporium;而對抑制作用較弱的水稻紋枯病、油菜菌核病來(lái)說(shuō),在生活上均不產(chǎn)生無(wú)性孢子而以菌核作為無(wú)性繁殖體。這種抑制作用強弱與真菌分類(lèi)是否有某種聯(lián)系需進(jìn)一步研究。
從提高殺菌劑滲透性角度解釋?zhuān)呓疣缤ㄈ┛膳c任何殺菌劑混配并提高其防治效果。從抑制病原菌孢子萌發(fā)角度解釋?zhuān)捎诒狙芯拷Y果表明高金噻酮(三代)對多種植物病原真菌孢子都有抑制作用。因此本品與各種類(lèi)型殺菌劑特別是廣譜性殺菌劑混配將有助于藥效的發(fā)揮。另一方面,由于高金噻酮(三代)對供試菌孢子素養力強弱不完全相同,因此這一結果提示,高金噻酮(三代)與某些特定殺菌劑混用,將有針對性的提高對某種病害的防制效果。本研究為這種混配途徑提供了素養理學(xué)依據。